Високоактивний щодо аеробних грамнегативних бактерій: Escherichia coli, Shigella spp., Salmonella spp., Enterobacter spp., Klebsiella spp., Serratia spp., Proteus spp., Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp.
Кратність введення – 2-3 рази на добу. Внутрішньовенно краплинно. Гентаміцин вводять протягом 1,5-2 год, розведений в 0,9% розчині натрію хлориду або 5% розчині декстрози, об'єм, що вводиться – 50-300 мл, у дітей об'єм рідини, що вводиться, повинен бути меншим (концентрація не повинна перевищувати 1 мг/мл = 0,1%).
Пацієнтам з інфекційно-запальними захворюваннями сечових шляхів та нормальною функцією нирок призначають 1 раз на добу в дозі 120-160 мг протягом 7-10 днів; при гонореї – 240-280 мг одноразово. При одноразовому внутрішньовенному введенні добової дози гентаміцину час введення має становити 30-60 хвилин.